RNAscope®技術(shù)由美國Advanced Cell Diagnostics（ACD）公司于2012年推出，是RNA原位雜交（ISH）領(lǐng)域的革命性突破。該技術(shù)通過獨特的雙Z探針設(shè)計和級聯(lián)信號放大系統(tǒng)，實現(xiàn)了單細胞水平上單個RNA分子的可視化與精確定量，解決了傳統(tǒng)PCR和原位雜交技術(shù)無法兼顧“原位信息"與“高靈敏度"的痛點。  

 一、技術(shù)原理：雙Z探針如何攻克原位雜交的世紀(jì)難題？  

1. 探針設(shè)計：特異性與靈敏度的平衡藝術(shù)  

   每個目標(biāo)RNA對應(yīng)專屬的Z形探針，每對探針由兩條獨立序列構(gòu)成：  

     - 底部：18-25個堿基，精準(zhǔn)互補結(jié)合目標(biāo)RNA；  

     - 頂端：雙探針拼接成28個堿基的結(jié)合域，用于捕獲信號放大前體序列。  

    創(chuàng)新性要求兩探針必須緊鄰結(jié)合才能觸發(fā)信號，將非特異性結(jié)合導(dǎo)致的背景噪音降至近乎為零。  

2. 信號放大：分子“多米諾骨牌"效應(yīng)  

   信號生成通過四級級聯(lián)放大實現(xiàn)：  最終每個RNA分子在顯微鏡下呈現(xiàn)為一個清晰可辨的點狀信號，實現(xiàn)單分子定量。  

 二、性能優(yōu)勢：為何頂·級藥企與期刊紛紛青睞？  

超高靈敏度：僅需3對探針結(jié)合即可檢測單個RNA分子，即使目標(biāo)RNA部分降解（如FFPE樣本）仍可穩(wěn)定檢出；  

多重檢測能力：單張切片上同步檢測3種RNA（熒光法）或2種RNA（顯色法），并可聯(lián)合蛋白共標(biāo)；  

全流程高效：手工操作僅需2.5小時，兼容石蠟切片、冰凍組織及細胞樣本；    

 三、應(yīng)用場景：從腫瘤微環(huán)境到基因治療  

1. 腫瘤免疫治療研究的“隱形顯微鏡"  

    解析PD-1/PD-L1等免疫檢查點在腫瘤細胞與T細胞間的空間分布；  

    追蹤細胞因子mRNA（如IL-2、IFN-γ）在腫瘤微環(huán)境中的分泌來源。  

2. 神經(jīng)科學(xué)：繪制腦中的RNA地圖  

    可視化神經(jīng)元內(nèi)低豐度非編碼RNA（如lncRNA）的亞定位；  

追蹤神經(jīng)活性標(biāo)志物（如c-fos）的動態(tài)表達。

3. 病毒與宿主博弈的見證者  

    直接觀察HPV、HIV等病毒RNA在宿主細胞內(nèi)的復(fù)制位點，為抗病毒·藥物提供靶點證據(jù)。  

4. 藥物開發(fā)全周期護航  

    靶點驗證：確認候選藥物作用靶標(biāo)的組織分布；  

    臨床前安全評價：檢測藥物是否在非靶器官（如心臟、肝臟）誘發(fā)毒性RNA表達。  

 四、技術(shù)進化：空間多組學(xué)時代的領(lǐng)·跑者  

2023年，ACD進一步推出多靶標(biāo)原位共檢方案，已成為單細胞測序數(shù)據(jù)原位驗證的核心工具，推動“空間多組學(xué)"在腫瘤異質(zhì)性研究中的應(yīng)用。  

訂購信息：